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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Brisbane/60/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 人細胞裂解液 (陽性對照) 苯甲酰基十字孢堿(PKC-412)質量規格：≥96%,美國進口Midostaurin

A431 人表皮癌細胞無水鄰菲啰啉；1,10-菲羅啉質量規格：AR,>99%1,10 –Phenanthroline anhydrous

PLC/PRF/5人肝癌亞力山大細胞 PLC/PRF/5 human hepatoma cell Alexander MEM培養基(GIBCO)+10%FBS鄰菲啰啉一水；1,10-菲羅啉一水質量規格：AR,>99%1,10-Phenanthroline hydrate

RSPO3 Protein Human 重組人 RSPO3 / R-spondin 3 蛋白 (aa 1-146, His 標簽)鄰菲啰啉鹽酸鹽一水；1,10-菲羅啉鹽酸鹽質量規格：AR,>99%1,10-Phenanthroline   monohydrate

人骨骼肌細胞 (HSkMC)( 5×105 ) mRTEC, 小鼠腎小管上皮細胞 Mouse酮色林,凱他色林(標準品)質量規格：HPLC>98%,標準品Ketanserin
肺成纖維細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)硫酸氫氯吡格雷 II型質量規格：含量97.0%-101.5%，II型Clopidogrel Bisulfate

CCRF-CEM細胞，人急性細胞白血病T細胞 小鼠白血病細胞,C3細胞 人肝竇內皮細胞cDNAHHSEC cDNA萘丁美酮/萘普酮質量規格：>99%Nabumetone

PC-12(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸洛哌丁胺(標準品)質量規格：HPLC>99%,標準品Loperamide HCl

CT26.WT(小鼠結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2 CL-0198RM-1(小鼠前列腺癌細胞)5×106cells/瓶×2 人APP基因轉染CHO細胞株;7WD10酮咯酸氨丁三醇質量規格：>98.5%,USP,BRKetorolac Tromethamine

大鼠肝細胞;BRL 3A酮咯酸氨丁三醇（標準品）質量規格：HPLC>98%,標準品Ketorolac Tromethamine
RLF, 大鼠成纖維細胞 STJ.EPI.H7細胞 COS-1(SV40 轉化的非洲綠猴腎細胞)S-(+)-2-基-4--1-，英文名或英文縮寫：L-Leucinol，級別：BR，98%，規格：5克

人結直腸腺癌細胞;HCT 116 [HCT116]3，5-二基異坐，97% 3,5-Dimqthylisoxczolq 300-87-8

REG1A Others Human 人 REG1A / PSPS 人細胞裂解液 (陽性對照) PHOSPHATEBUFFEREDSALINE(PBS)20XCONCENTRATE,pH7.5PBS溶液超級透明無混濁液體RTsigma

人腦微血管內皮細胞總RNAHBMEC NA脲酶，英文名或英文縮寫：Urease(jack bean)，級別：BR，RZ～3,≥250u/mg，規格：25克

KYNU Others Mouse 小鼠 KYNU / Kynureninase 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) -基本酚2-Aminopxenol
PVDF膜0.22μm正常大鼠腎細胞;NRK硫代煙酰胺腺嘌呤二核苷酸1酸鈉鹽Thionicotinamide adenine dinucleotidephosphate  salt質量規格：美國進口

Panc 10.05細胞，人胰腺腺癌細胞 人舌鱗癌細胞系,TSCCA細胞 大鼠腦膠質瘤細胞;C6煙酸腺嘌呤二核苷1酸鈉鹽Nicotinic acid adenine dinucleotide phosphate  salt質量規格：美國進口

JeKo-1(人套細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2煙酸腺嘌呤二核苷酸鈉鹽Nicotinic acid adenine dinucleotide  salt質量規格：美國進口

Promocell C-25020 Hepatocyte Maienance Medium, 肝細胞維持培養液 500mlα-煙酰胺腺嘌呤二核苷酸α-Nicotinamide adenine dinucleotide質量規格：美國進口

人胃腺癌細胞;SGC-7901 [SGC7901]NAD+, 鋰鹽NAD+, Lithium Salt質量規格：美國進口
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。